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Clinical application

PCR在肿瘤诊断方向的临床应用
作者:博日菲律宾太阳网娱乐 时间:2018-05-11 10:32:07 浏览数:4075

菲律宾太阳网娱乐实时荧光定量PCR的应用范围很广泛,已广泛应用于临床及生命科学研究的各个领域中。在科研方面可定量分析各种基因的表达分析,基因突变和多态性分析,单核苷酸多态SNP测定及易位基因的检测;在医疗方面可用于免疫组化分析、临床疾病早期诊断、病原体检测、耐药性分析、肿瘤微小残留病变研究等。

肿瘤微小残留病变的检测:肿瘤的本质是细胞内基因发生了变化,是一种多基因异常的疾病,这些异常变化用实时荧光定量PCR方法都可以检测出来。肿瘤疾病尤其是血液的恶性肿瘤常伴有特异性基因的易位,这种易位往往可以作为监测临床治疗效果的一种肿瘤标志。目前用此方法进行过端粒酶hTERT基因、慢性粒细胞性白血病ER基因、肿瘤MDR1基因等,尽管肿瘤发病的分子机制尚未完全阐明,但相关基因的遗传学改变的积累是致癌性转变的根本原因之一已得到普遍承认。癌基因的突变和表达增加,在许多肿瘤早期就出现。实时荧光PCR技术不仅能有效地检测到基因的突变,而且可以准确检测癌基因的表达量。如定量结直肠癌淋巴结的癌胚抗原(CEA)mRNA的表达量,可作为诊断癌症微转移的重要依据。虽然在过去的几十年里,治疗方案的改进已明显地延长了患者的生存期,但是缓解期的患者仍存在复发的危险性。因此微小残留病变的检测对于进一步调整治疗方案是至关重要的。实时荧光定

PCR的应用正成为检测肿瘤微小残留分子标志的一种必备研究工具。通过对肿瘤融合基因的定量测定能指导临床对患者实行个体化的治疗。目前的研究证明用实时荧光定量PCR来检测融合基因有助于对这些患者的微小残留病变进行定量,其作为预后的指标或对治疗方案的评估是有价值的。同样的方法也被用于定量其他的易位融合基因水平。

菲律宾太阳网娱乐细胞因子的表达分析:许多不同类型的细胞都能分泌低分子量的蛋白质,其中包括淋巴细胞、抗原递呈细胞、单核细胞、内皮细胞和成纤维细胞。细胞因子可被分为不同的组:白细胞介素、干扰素、集落刺激因子、肿瘤坏死因子、转化生长因子和化学因子。为了阐明在许多炎症反应,自身免疫性疾病和器官移植排异中的免疫致病途径,细胞因子mRNA表达谱的可靠定量是很重要的。尽管被检样本中细胞因子含量往往极低,然而实时荧光反转录PCR以其高敏感性和准确性在细胞因子的定量中越来越受到青睐。使用双色荧光标记探针,结合不同的引物设计,可以实现对某些先天性疾病的定量检测。应用实时荧光定量PCR方法对β地中海贫血症(β地贫)患者β与γ珠蛋白mRNA水平进行检测,其结果特异性强、定量准确,为了解β地贫的分子病理机制及其临床诊断提供了可靠的检测数据。迄今对遗传性物质改变引起的疾病还无法根治,只能通过产前监测和产前基因诊断,减少病婴出生。因此,实时荧光定量PCR方法可用于产前监测和产前基因诊断。

菲律宾太阳网娱乐病毒感染的定量监测:扩增技术的发展使得对病毒的定性或定量检测的能力随之提高,也使研究病毒的负荷和疾病进展的关系成为可能。目前运用较多的是在器官移植中对使用免疫抑制剂的患者用实时荧光定量PCR来定量测定巨细胞病毒感染。研究表明在骨髓移植的患者中用实时荧光定量PCR检测巨细胞病毒感染比传统的pp65抗原试验更敏感,抗巨细胞病毒药物治疗能使血中的病毒含量下降。目前,用此方法还进行了对结核分枝杆菌、免疫缺陷病毒、肝炎病毒、流感病毒、巨细胞病毒、EB病毒、淋球菌、沙眼衣原体,人乳头瘤病毒等病原体可以进行准确的定量检测。

同样在国内,2004年针对Sars流行性病的检测和诊断使得荧光定量PCR技术得以应用和发展。荧光定量PCR问世后的几年中,积累了大量有关病原体核酸量与感染性疾病发生、发展和预后之间关系的资料,这些研究资料不断丰富,将形成感染性疾病的临床分子诊断标准。目前,实时荧光PCR技术已应用于肝病、性病以及人类免疫缺陷病毒(HIV)等各种病原体的临床诊断,为实现快速准确诊断提供了有效的检测方法。

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